返朴，返朴，努力做好科普！微信《返朴》，也欢迎来玩呀！ 阅读原文 撰文 | 李庆超（山东师范大学） 时间过得真快，转眼间，不几天就过年了。像做梦一样，真怕一觉醒来年假都过完了( Ĭ ^ Ĭ )。想当初我的导师教我和面，已经是好几年前了：和面要做到“三光”，面盆光，手上光，都没有粘的面；和出的面团也要光，表面平整光洁。可见我在家不是个爱干活的孩子，这种生活常识要到了读博才从一个病毒学家那里学到（某人：博导还要教和面？现在对博导要求这么高了吗？）。 面，是怎么发起来的？ 图 1：山东非物质文化遗产：胶东花饽饽丨来源：http://www.jdxzhuabobo.com/ 引酵 蒸馒头、包子需要发面，包水饺、擀面条不需要发面。大家吃面食也能感受得到，发过的面松软可口，面里有很多气孔；而水饺皮或面条比较劲道，面里没有气孔，看上去也相对比较透明。是什么造成这两者的区别呢？没有发过的面称为“死面”，发过的面称为“发面”。是什么使面不“死”，而发起来呢？ 这里的关键就在于和面的时候是否放入了“引酵”，也叫面肥、老面。各地方言叫法不一，实际上是一种东西，都是上一次蒸馒头剩下的小面团。因为有一点历史了，引酵显得比较暗淡，刨开里面可能都已经能够拉丝了，闻起来有点酒香或者酸味。实质上，引酵是带有酵母菌种的面团，如果家里不经常蒸馒头，可以直接使用鲜酵母块或干酵母粉。把酵母菌提取出来就是鲜酵母，而经过干燥、造粒工艺，就成为干酵母。鲜酵母是处于活跃状态的鲜菌块，储存时间短，适宜冷藏，但发酵能力强；酵母粉则处于脱水休眠状态的冻干菌粉，储存时间长。在发面的原理上，引酵、鲜酵母、干酵母都是一样的：酵母接种到面团中后，在面团里生长繁殖，产生二氧化碳气体。因此，发面之后面团体积变大，并可见气孔。面团在蒸烤加热过程中，二氧化碳气体溢出、膨胀，产生更多更大的气孔，使面食变得松软可口（小苏打 NaHCO3 也可以达到类似的效果，本文未讨论）。 图 2：发酵比较久的“引酵”（左上）、鲜酵母块（右上）、干酵母粉（左下），以及发好的面团。丨图片来自网络 酵母 酵母一词在生活中一般是指面团、酒精发酵用的菌种。微生物学上，酵母（Yeast）是指单细胞真菌，目前共发现 1500 多种酵母，占已知真菌种类的 1%[1]（真菌还包括主要以菌丝形式存在的霉菌，和可以产生大型子实体的蕈[xùn]，也就是蘑菇）。人类利用酵母来酿酒、烘焙、制作面食的历史非常久远，最早在新石器时代，人类就已经会酿酒了。 但是，真正理解这些发酵的过程却要等到 1857 年。 当时，法国科学家巴斯德发现，酒精发酵并不是一种简单的化学反应，而是由生物参与、引起的。在这个过程中发挥作用的小可爱主要是酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），它还有啤酒酵母、面包酵母等名字，咱们中国发面蒸馒头一般使用的也是它（它要是咱中国人发现的，名字可能就会叫“白酒酵母”“发面酵母”了）。不做特殊说明的话，“酵母”一词一般是指广义的单细胞真菌，或者狭义的酿酒酵母。 图 3. 各种酵母的菌落及名称[2] 酿酒酵母最早是从葡萄皮上分离的（大多数酵母喜欢含糖较高的环境），菌落呈灰白色、表面湿润，有酒香气。酵母菌是真核单细胞生物，个体非常小，在 5-10 微米左右（一毫米长能摆放 150 个左右的酵母菌），呈球形或椭球形。 图 4. 用光学显微镜观察酿酒酵母在光镜丨来源：wikipedia 酵母菌表面被其细胞壁覆盖，比较光滑，但是电子扫描显微镜下观察可以看到一些圆形的疤痕，这是酿酒酵母在进行出芽生殖之后留下的痕迹。与大多数细菌或咱们人类体细胞进行均等的二分裂不同，酿酒酵母在分裂过程中，子细胞比较小，像是从母细胞上生出的小芽。等到芽体足够大后与母细胞分离，断裂的地方就形成了蒂痕或芽痕。 图 5. 酿酒酵母在电子显微镜下的形态丨来源：wikipedia 发酵 那么这圆滚滚的小可爱在面团里都干了啥呢？ 简单点说，就是它们“生气了”！不气，馒头就不鼓。 专业地说，就是“发酵了”。酵母菌在无氧条件下分解糖类，产生二氧化碳和酒精。这个过程是酵母分解代谢的一部分，目的是获得能量、还原力及某些生命过程所必须的化合物。 “发酵”一词在生活和微生物领域都很常用。广义的发酵是指，人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动，来制备微生物菌体本身、或微生物的直接代谢产物、或微生物的次级代谢产物。 图 6. 酵母分解糖类释放能量，产生酒精和二氧化碳[3] 那么，酵母又是怎么把糖类发酵为酒精和二氧化碳的呢？ 1897 年，德国化学家爱德华·布赫纳（Eduard Buchner）把酵母磨得稀碎，直到没有活的酵母存在。他发现这种没有活酵母菌的提取液也能够将糖分解为酒精和二氧化碳。（布赫纳不知道，后来有一个日本公司靠研磨酵母赚了大钱。人家的酵母提取液来到中国之后叫做“神仙水”。） 布赫纳把酵母中所含的这种东西称为酒化酶（Zymase），并获得了 1907 年的诺贝尔化学奖[4]。 现在我们知道，酒精发酵实际上是一系列酶综合作用的结果，而酒化酶实际上是酶的混合物。 酶（enzyme）是具有催化作用的生物大分子，一般是蛋白质。酶还有另一个古老的名字：酵素，咱们已经废弃不用了。敲黑板加高亮醒目：反复使用“酵素”的中文简体文案就是忽悠人的文案，望周知。 那么发酵过程具体是哪些酶、催化了什么化学反应呢？那可就到了整个生命科学院本科学习阶段最难的部分之一了：生化之代谢（为了躲避这一部分，我选择了不考生化的考研专业。后来发现我全然忘记微生物学里也会讲，直到我需要教这一部分内容的时候。ლ( ლ)）。 不管是淀粉还是蔗糖，任何糖类都要转化成葡萄糖进入糖酵解（Glycolysis）途径进行降解。糖酵解，是将葡萄糖 C6H12O6 转化为 ①丙酮酸 CH3COCOOH 的代谢途径。糖酵解过程释放出自由能，通过底物水平磷酸化，形成 ②高能分子：三磷酸腺苷 (ATP) 。同时，糖酵解过程也生成 ③“还原力”：还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH+H+)。 糖酵解发生于胞质中，不需要氧气。最常见的糖酵解途径是 EMP 途径（Embden–Meyerhof–Parnas，发现此过程的三个主要科学家的名字），该过程需要十个酶，经过十步反应。 图 7. 糖酵解的总反应及具体过程丨作者改编自 wikipedia 糖酵解产生的 ATP 可以为生命活动提供必要的能量，丙酮酸和还原力则有不同的安排。在有氧条件下，丙酮酸进入三羧酸循环，进行分解，产生二氧化碳。在此次过程中，除了底物水平磷酸化产生能量之外，还会产生更多的还原力（NADH+H+和 FADH2）。还原力通过氧化磷酸化过程，产生更多的 ATP，而氢离子最终与氧气结合，产生水。酵母在无氧条件下，丙酮酸通过丙酮酸脱羧酶，产生二氧化碳和乙醛。乙醛作为内源性有机电子受体，可以接收“无处安放的”NADH+H+还原力，最终被还原为乙醇。 这种在无氧条件下，糖酵解反应中产生的 NADH+H+，与内源性有机电子受体结合，仅以有底物水平磷酸化产能的过程称为发酵，是最为狭义的“发酵”。 Tips 三磷酸腺苷 ATP 是所有已知生命中应用做广泛的“能量货币”，为生命活动直接供能。ATP 的产生有两种方式。第一种是底物水平磷酸化，这种方式是在酶的参与下，把含有高能磷酸键的化合物能量直接转移给 ATP。第二种方式是 ATP 合酶利用质子动势（proton motive force，PMF）能量，以化学渗透偶联的方式产生 ATP（氢离子在质膜两侧浓度不同，氢离子从浓度高的一侧向浓度低的一侧回流时，推动 ATP 合酶合成 ATP）。质子动势来源主要是生物氧化过程和光合作用推动的电子传递链形成的。 结语 哇哦，虽然人家酵母菌只是“生气”，产生了一点二氧化碳气体，没想到细胞里面还经历了这么复杂的过程。其实，酵母除了在食品领域有广泛而悠久的应用之外，它也是一种重要的模式生物，在细胞骨架、细胞周期、减数分裂等领域的研究中都发挥了重要作用。这是因为酵母养起来几乎和大肠杆菌（基因工程的明星菌，一菌之力送走多少硕博研究生！）一样容易，但是酵母比大肠杆菌更接近人类，因为它是真核生物。 图 8：酵母是一种真核生物丨 Lallemand Brewing 此外，酵母也是一种重要的微生物工程菌，比如乙肝疫苗就是用酵母生产的。 图 9：使用酵母生产的乙肝疫苗丨来源：网络 就着馒头喝口酒，谢谢酵母！ 等等，酵母中也有可以导致疾病的种类，最常见的致病性酵母菌有隐球菌、球拟酵母菌、以及假丝酵母菌（念珠菌），一般造成机会性感染，或感染免疫力低下的患者（图就不放了，大家过个好年）。 参考文献 [1] https://en.wikipedia.org/wiki/Yeast [2] Alexander N. Glazer，Hiroshi Nikaido，MICROBIAL BIOTECHNOLOGY，Fundamentals of Applied Microbiology, Second Edition [3] https://socratic.org/questions/how-do-the-products-of-fermentation-in-animals-differ-from-yeast [4] https://en.wikipedia.org/wiki/Zymase 阅读原文
